◆激光共聚焦顯微鏡操作規程

激光掃描共聚焦顯微鏡（Laser scanning microscopy,LSM）是80年代發展起來的一項具有劃時代意義的高科技新技術，是當今世界上最先進的分子生物學分析儀器。它是在熒光顯微鏡成像的基礎上加裝了激光掃描裝置，利用計算機進行圖像處理，使用紫外光或激光激發熒光探針，從而得到細胞或組織内部微細結構的熒光圖像，觀察細胞的形态變化或生理功能的改變。

為保證系統正常工作，激光共聚焦顯微鏡必須在相關技術人員的輔助下使用，具體操作規程如下：

一、開機步驟：

接通系統總開關

顯微鏡、Ar離子激光器、He-Ne激光器平時可以保持物理“開”狀态，軟件啟動時才真正啟動

開啟UV激光器時，要先開啟相應冷卻系統，并使其運行大約15min後使用

啟動計算機

二、采集、存貯樣品圖象：

1. 啟動軟件

2. 根據樣品的熒光染料激發波長，選擇開啟相應激光器，打開汞燈電源

用明場、DIC或普通熒光觀察标本，找到觀察對象

3. 光路轉換至掃描觀察模式

4. 設置掃描速度、掃描分辨率、掃描放大倍數等參數，快速預覽，調整針孔大小、激光管電壓、圖象亮度對比度、降噪調整等至最佳狀态

5. 獲取圖象并保存

三、圖象的輸出及關機：

1. 關閉汞燈電源

2. 将激光輸出功率旋鈕調節到最小，關閉激光器，保持其冷卻系統繼續工作10min以上再關閉電源

3. 實驗結果拷貝

4. 待風扇停止轉動後退出軟件，關閉計算機

5. 關閉系統總開關

6. 填寫實驗登記并簽字。

7. 清理物鏡，保持清潔。

◆正置熒光顯微鏡操作規程

1 .接通電源。

2. 打開顯微鏡，打開計算機，進入桌面，雙擊" Axioskop "圖标。

3.圖像獲取

概 述

在用計算機處理圖像之前先要獲取數字圖像。電子攝像機從顯微鏡獲取圖像信息，并轉換成電子信号，這些信号經過數字處理後顯示在計算機上。與模拟攝像技術相比，現代數字攝像機在信号質量和分辨率方面具有優勢，數據直接在攝像機裡進行數字化。

為了把數據傳送到計算機，還需要幀采集器、接口轉換器或标準數字接口，它們通過專門的軟件（稱為驅動程序）進行操作。這些設備驅動程序都是整合在AxioVision系統裡的。

在安裝幀采集器、接口轉換器等時請使用Carl Zeiss或相應制造商提供的相應驅動程序和手冊。

下面将介紹如何僅僅用幾次鼠标點擊來利用AxioVision獲取圖像（以AxioCam HR為例）。

利用标準工作流程是控制圖像獲取最容易的方法。如果沒有顯示工作流程窗口，從視圖（View）菜單選擇窗口（Windows）功能，再選擇工作流程（Workflow）命令。

注意：工作流程窗口可能已經打開，隻是被工作區窗口遮住了。這時單擊工作區底部的Workflow标簽。